Waters色譜柱開啟和安裝的步驟

瀏覽： 2409| 更新時間：2020-11-30 |

色譜柱開啟和安裝的推薦步驟：

使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統，確保系統干凈，不含任何緩沖鹽和污染物。

取用色譜柱時避免磕碰掉落。

將色譜柱入口端連接到系統上，柱出口端先不要連接，色譜柱身上有箭頭標明正確流向。

在0.1 mL/min流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱，然后在2分鐘內將流速升至0.5 mL/min。

當溶劑均勻的從柱出口端流出，停流速，將色譜柱出口端接到系統檢測器上（這樣可以避免氣泡進入檢測系統，并且可快速達到基線平衡）。

重啟流速，按照步驟4的方法逐漸提高流速，至常規分析時所使用的流速。

參考柱效測試報告中的方法，使用該流動相條件平衡色譜柱，通常需要使用5-10倍柱體積的流動相，直至壓力與基線穩定。

測試柱效。如果沒有柱效測試報告中的分析物，請聯系沃特世化學消耗品部門尋求支持，使用合適的濃度與進樣量。柱效結果略低于柱效測試報告屬正常情況。如結果明顯偏低、峰形拖尾，提示色譜柱和/或所使用的液相系統處于非理想狀態，需要進行故障排查。

當使用2.1 mm內徑色譜柱時，建議優化系統以減少譜帶展寬，包括：使用檢測器微量流通池，減少進樣器loop環體積，使用較小內徑（如0.005''或0.12 mm）的系統管路。并確保管路與色譜柱連接恰當、無死體積。

當使用小顆粒填料（如2.5 um）短柱進行高效快速分離時，需要考慮以下因素：

確保管路與色譜柱連接恰當、無死體積，盡量優化系統減少譜帶展寬；

提高采樣頻率至10點/秒以上；

較小粒徑的色譜柱產生的柱壓較高，而較小粒徑要達到優色譜效率所需的線速度較高，請根據所用LC系統的實際情況調節流速；

可使用較高的柱溫來補償小顆粒造成的壓力升高，例如40°C。使用雜化顆粒反相色譜柱時，可使用45°C或更高。